高速逆流色譜儀技術(shù)的發(fā)展歷程
點(diǎn)擊次數(shù):1791 更新時(shí)間:2017-07-06
高速逆流色譜儀技術(shù)的發(fā)展歷程
高速逆流色譜法是建立在單向性流體動(dòng)力平衡體系之上的一種逆流色譜分離方法,它是在研究旋轉(zhuǎn)管的流體動(dòng)力平衡時(shí)偶然發(fā)現(xiàn)的。當(dāng)螺旋管在慢速轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí),螺旋管中的兩相都從一端分布到另一端。用某一相作移動(dòng)相從一端向另一端洗脫時(shí),另一相在螺旋管里的保留值大約50%,但這一保留量會(huì)隨著移動(dòng)相流速的增大而減小,使分離效率降低。但使螺旋管的轉(zhuǎn)速加快時(shí),兩相的分布發(fā)生變化。當(dāng)轉(zhuǎn)速達(dá)到臨界范圍時(shí),兩相就會(huì)沿螺旋管長(zhǎng)度*分開,其中一相全部占據(jù)首端的一段,我們稱這一相為首端相,另一段全部占據(jù)尾端的一段,稱為尾端相。高速逆流色譜正是利用了兩相的這種單向性分布特征,在高的螺旋管轉(zhuǎn)動(dòng)速下,如果從尾端送入首端相,它將穿過(guò)尾端相而移向首端,同樣,如果從首端相送入尾相,它將穿過(guò)首端相而移向螺旋管的尾端。分離時(shí),在螺旋管內(nèi)首先注入其中的一相(固定相),然后從合適的一端泵入移動(dòng)相,讓它載著樣品在螺旋管中無(wú)限次的分配。儀器轉(zhuǎn)速越快,固定相保留越多,分離效果越好,且大大地提高了分離速度,故稱高速逆流色譜。
高速逆流色譜 ( high-speed countercurrent chromatography , HSCCC )是 20 世紀(jì) 80 年代發(fā)展起來(lái)的一種連續(xù)的液—液分配色譜分離技術(shù), 它不用任何固態(tài)的支撐物或載體。 它利用兩相溶劑體系在高速旋轉(zhuǎn)的螺旋管內(nèi)建立起一種特殊的單向性流體動(dòng)力學(xué)平衡,當(dāng)其中一相作為固定相,另一相作為流動(dòng)相,在連續(xù)洗脫的過(guò)程中能保留大量固定相。
由于不需要固體支撐體,物質(zhì)的分離依據(jù)其在兩相中分配系數(shù)的不同而實(shí)現(xiàn),因而避免了因不可逆吸附而引起的樣品損失、失活、變性等,不僅使樣品能夠全部回收,回收的樣品更能反映其本來(lái)的特性,特別適合于天然生物活性成分的分離。而且由于被分離物質(zhì)與液態(tài)固定相之間能夠充分接觸,使得樣品的制備量大大提高,是一種理想的制備分離手段。
它相對(duì)于傳統(tǒng)的固—液柱色譜技術(shù),具有適用范圍廣、操作靈活、、快速、制備量大、費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn)。HSCCC 技術(shù)正在發(fā)展成為一種備受關(guān)注的新型分離純化技術(shù),已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥、天然產(chǎn)物、食品和化妝品等領(lǐng)域, 特別在天然產(chǎn)物行業(yè)中已被認(rèn)為是一種有效的新型分離技 術(shù);適合于中小分子類物質(zhì)的分離純化。
我國(guó)是繼美國(guó)、日本之后zui早開展逆流色譜應(yīng)用的國(guó)家,俄羅斯、法國(guó)、英國(guó)、瑞士等國(guó)也都開展了此項(xiàng)研究。美國(guó)FDA食品和藥物管理局(Food and Drug Administration)及世界衛(wèi)生組織( WHO )都引用此項(xiàng)技術(shù)作為抗生素成分的分離檢定, 90 年代以來(lái),高速逆流色譜被廣泛地應(yīng)用于天然藥物成分的分離制備和分析檢定中。